搞女人出水视频在线观看,啊啊……不要啊操我视频,女人日逼逼逼逼,久久96热在精品国产三级

銷售熱線

19126518388

  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置：首頁 > 技術(shù)文章 > 制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析

    制備YAC DNA進(jìn)行Southern印跡分析

    發(fā)布時(shí)間： 2021-12-24　　點(diǎn)擊次數(shù)： 948次

    材料與儀器

    酵母菌
    AHC SCE SCEM Tris·Cl EDTA TE 乙酸甲 RNase A 異丙醇 NaCl
    培養(yǎng)箱 離心管 轉(zhuǎn)子

    步驟


    1.  接種一個(gè)紅色的含YAC克隆的酵母菌落于盛有20 ml AHC培養(yǎng)基的250 ml 三角燒瓶中，在旋轉(zhuǎn)搖床上30℃ 250 r/min 振蕩培養(yǎng)24 h。
     
    2.  擴(kuò)大培養(yǎng)：取1ml 由步驟1獲得的粉紅色菌懸液接種于盛有100 ml AHC培養(yǎng)基的 1 000 ml三角燒瓶中，于30℃ 250 r/min搖床培養(yǎng)24 h。

    3.  將菌懸液移入2個(gè)50 ml 的錐形離心管中，于2 000 g 離心5 min，棄上清，共用5 ml SCE緩沖液重懸菌體，并合并到一個(gè)試管中。

    4.  加1 ml SCEM緩沖液，在旋轉(zhuǎn)搖床中37℃ 100 r/min 輕搖晃混勻。

    5.  于4℃ 2 000 g 離心棄上清，菌體用5 ml Tris/EDTA裂解液重懸。

    6.  加0.5 ml 10%SDS顛倒混合數(shù)次，于65℃溫育20 min。
     
    7.  加2 ml 冰浴的5 mol/l pH4.8的乙酸甲緩沖液，顛倒混合數(shù)次后置于冰浴60 min。

    8.  于室溫2 000 g 離心10 min，小心將含核酸的上清轉(zhuǎn)移到一個(gè)新管中。加室溫2倍體積的95%乙醇，顛倒混勻。

    9.  于室溫2 000 g 離心5 min，棄上清，在室溫晾干10~15 min，分別加入3 ml TE緩沖液，pH8.0于37℃過夜溶解核酸。

    10.  加入0.1 ml 的1 mg/ml 無DNA酶活性的RNase A，于37℃溫育1 h。
     
    11.  加入6 ml 室溫的異丙醇，振蕩并顛倒混勻后用一支毛細(xì)管纏繞起染色體，然后溶于0.5 ml TE緩沖液中。

    12.  加入50 μl 5 mol/l NaCl和2 ml 95%乙醇，顛倒混勻。

    13.  再一次纏繞起染色體DNA，并溶于0.5 ml TE緩沖液中，于4℃保存?zhèn)溆谩?/div> 
    14.  取毎小份2 μg 的YAC DNA和15 μg 用以構(gòu)建YAC文庫的某物種或個(gè)體的基因組DNA。

    15.  采用幾種高頻切割的限制性內(nèi)切酶進(jìn)行酶切，接著用單拷貝探針進(jìn)行雜交和核酸印跡分析。
     
    16.   一旦通過核酸印跡實(shí)驗(yàn)確證YAC克隆，那么可通過制備染色體凝膠校塊塞和進(jìn)行脈沖電場凝膠電泳，來明確重組YAC的大小并對其穩(wěn)定性進(jìn)行初步評價(jià)。


    同實(shí)驗(yàn)其他方法

    YAC 克隆的分析實(shí)驗(yàn)

    1.  用接種棒將含重組載體pYAC的AB1380菌株劃線接種在AHC平板上，倒扣平板于30℃培養(yǎng)，直至長出1~3 mm 大小的紅色菌落為止。 2.  短期保存：用Parafilm膜將平

    以上就是本期的內(nèi)容，更多資訊，歡迎點(diǎn)擊安培生物網(wǎng)站鏈接了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹：

    安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶，提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù)；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)，努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


產(chǎn)品中心 Products
成人国产经典视频在线观看| 美国色情经典巜肉欲在线| 女同互慰高潮呻吟免费播放| 男人爱看的网站| chinese耄耋老太交| 99精品国产一区二区三区不卡| 欧美超级乱婬视频播放| 亚洲国产精品无码久久青草| 少妇BBWBBW性生话| 一边啪啪一边呻吟av夜夜嗨| 日本免费一区二区三区高清视频 | 亚洲中文字幕一区精品自拍| 国内精品久久久久久久影视麻豆| 美女露100%双奶头无遮挡免费| 欧美男男猛男GAYXXX| 少妇装睡让我滑了进去| 性xxxxx大片免费视频| 抱姝姝A片亚洲综合久久国产| 久久久亚洲AV成人无码精品网站 | 无码任你躁久久久久久老妇APP | 亚洲欧美综合在线一区| 人人妻人人澡人人爽精品日本| 国产亚洲精品久久久久久| 免费无码国产V片在线观看| 国产精品久久久久久久久久久不卡| 红杏永久免费视频入口| 粉嫩小泬视频无码视频软件| 欧美激情在线视频| 护士做爰乱高潮全过程| 欧美精品高清无码| 四虎成人精品永久免费AV| 人妻人人澡人人添人人爽 | 久久久亚洲欧洲日产国码aⅴ| 高h喷水荡肉爽文公交车| 处破学生毛都没长齐在线播放| av人摸人人人澡人人超碰下载| 无码国产色欲xxxx视频| 丰满少妇被猛男猛烈进入久久| 久久久久久久性潮| 狠狠综合久久av一区二区| av毛片无码不卡中文字幕|