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    細(xì)胞培養(yǎng)試劑這樣用 ,你都對(duì)了嗎?

    發(fā)布時(shí)間: 2021-11-02  點(diǎn)擊次數(shù): 1178次

    01


    為什么要在溶解的一周內(nèi)使用貯存在4℃冰箱中的液體胰蛋白酶溶液?

    答:胰蛋白酶在4℃就可能開始降解,如果在室溫下放置超過30分鐘,就會(huì)變得不穩(wěn)定,但是胰酶在消化細(xì)胞前必須要預(yù)熱,否則容易出現(xiàn)酶活力不夠, 也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞消化不下來,所以為了更好的培養(yǎng)細(xì)胞,在細(xì)胞培養(yǎng)不多的時(shí)候可以分裝使用,這樣就不會(huì)出現(xiàn)上面的兩種情況了,還有就是配制胰酶的時(shí)候一定要注意降低熱源哦。


    02

    培養(yǎng)細(xì)胞生長減慢的原因有哪些?其解決辦法有哪些?

    答:可能得原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長必需成分如谷氨酰胺或生長因子等耗盡或缺乏或已被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液組分,比較新血清與舊血清支持細(xì)胞生長實(shí)驗(yàn)找到可能的原因。 

    解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷氨酰胺或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,丟棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在-5℃到-20℃;培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清*培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2 周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。

    03

    如何消除組織培養(yǎng)的污染?

    答:當(dāng)重要的培養(yǎng)細(xì)胞污染時(shí),研究者可能試圖消除或控制污染。首先,確定污染物是細(xì)菌、真菌、支原體或酵母,把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái),檢查HEPA過濾器。

    高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系有毒性,因而,做劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點(diǎn)在使用抗生素和抗霉菌素如時(shí)尤其重要。

    要是支原體污染,可以選擇我們的支原體抑制劑(啟達(dá)生物;貨號(hào):SD0034)來抑制支原體的生長,它可使大部分的支原體清除干凈,也可少量頑固的支原體。黑膠蟲污染也使目前實(shí)驗(yàn)室的一大問題,黑膠蟲清除劑對(duì)藥物的量和要求都很高,首先,使用的抗菌小分子純化度要高,這樣可降低產(chǎn)品本身存在的內(nèi)毒素,其次是加入的量,量少會(huì)清除不干凈黑膠蟲,但是量多會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的死亡,可以直接選擇我們的黑膠蟲抑制劑(啟達(dá)生物;貨號(hào):SD0036) 1ml/支裝,每100ml只需100ul即可,關(guān)鍵是價(jià)格,優(yōu)惠到您不能想象 。



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