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    qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析基本步驟(三)

    發(fā)布時(shí)間: 2021-10-15  點(diǎn)擊次數(shù): 1956次

    未經(jīng)處理的擴(kuò)增曲線(xiàn)對(duì)數(shù)圖如下。


    以下情況,基線(xiàn)不需要調(diào)節(jié):

    1、樣本擴(kuò)增曲線(xiàn)剛好在基線(xiàn)最大值的地方開(kāi)始。

    2、濃度最高的樣本,即擴(kuò)增曲線(xiàn)最快進(jìn)入指數(shù)期的,Ct值小于15(基數(shù)上限)。


    以下情況,基線(xiàn)需要調(diào)節(jié):


    1、最高濃度樣本的擴(kuò)增曲線(xiàn),起始點(diǎn)在基線(xiàn)最大值前面,表明基線(xiàn)太高。可以將基線(xiàn)結(jié)束值調(diào)小1~2個(gè)循環(huán)。

    qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析基本步驟(三)2、最高濃度樣本的擴(kuò)增曲線(xiàn),起始點(diǎn)距離基線(xiàn)最大值太遠(yuǎn),表明基線(xiàn)太低。可以將基線(xiàn)結(jié)束值調(diào)大1~2個(gè)循環(huán)數(shù)。

    qPCR實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析基本步驟(三)這兩種情況,擴(kuò)增曲線(xiàn)對(duì)數(shù)圖均會(huì)出現(xiàn)“破壞斷裂",即圖中紅色圈住的地方。

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